诊断法角逐验糖尿病肾病

三、尿白蛋白片段的检测

（一）方法免疫印迹法。

（二）实验步骤

1、尿样与样品处理液等量混合，置沸水浴3分钟。2、聚丙烯酰胺凝胶电泳，每孔加样20μι，电压200v。3、将胶上的蛋白带转印到硝基纤维素膜上，转印电流340ma，2小时后取出，封闭1小时。4、加入白蛋白抗体和酶标白蛋白，冰箱过夜。5、加入显色液，出现蛋白带为阳性，未见蛋白带为阴性。

（三）结论

通过实验得出凡是尿白蛋白阳性者，尿白蛋白片段也为阳性，而尿白蛋白阴性者中，仍有30%为尿白蛋白片段阳性。曾有人对后者进行随访观察，发现他们中有18%发展为尿白蛋白，蛋白阳性。因此，认为尿白蛋白片段具有更高的特异性和早期栓出率，能更早地发现dn患者。

综上所述，除尿微量白蛋白检测是目前人们较为公认的dn早期诊断指标外，其它两种都还在观察及研究中。目前国内外还没有建立尿铜蓝蛋白酶联免疫测定方法，市场上买不到试剂盒，其作用机理还待于进一步深入研究。免疫印迹法分析尿白蛋白片段，在我院已应用于临床，对尿白蛋白阴性者，再用本法检测分析，可以更有效地避免早期糖尿病肾病的漏诊，是预测肾脏病变的更为早期，更为灵敏的指标。