精子制动试验的注意事项

1、血清制备由于豚鼠血清中，含有对人精子有毒性的物质，因此用作补体的豚鼠血清，应在合并之前逐只检查，仅把无精子制动作用的豚鼠血清合并，用溶血反应测定血清的补体效价（ch），以无精子制动作用的未婚女性血清，调整补体效价为200ch左右，确保制动反应系统有足够的补体量（10ch）参与。豚鼠血清以0.5ml分装于小试管内，置-70℃保存备用。

（1）作补体用的豚鼠血清制备：一次用10～15只豚鼠，分别从心脏采血，低温下分离血清，分别以精子制动试验检测对人精子有无毒性，具体方法如下。

1）试验组：

处女血清0.25ml

精子悬浮液（40×106/ml）0.025ml}32℃/60min精子活动率（t%）

待检豚鼠血清0.05ml

2）对照组：

处女血清0.25ml

精子悬浮液（40×106/ml）0.025ml}32℃/60min精子活动率（c%）

灭活豚鼠血清（或不加豚鼠血清）0.05ml

两者比较c/t≥1、2判为有毒性，<1、2判为无毒性。

把1、2以下的豚鼠血清合并后，再测补体效价。

此外有人用ab血型的人血清作补体，不过ab血型人血清的补体效价比豚鼠血清要低得多，反应系统加入0.05ml血清仍不能充分把制动抗体检出，因此一般不采用。

2、精子洗涤精液采用丈夫或他人的都可以，都能取得相同的结果。但由于不孕妇女血中的精子制动抗体多数是由精浆抗原所产生的抗体，精浆有中和抗体的作用，会影响测定的结果。所以制备精子悬液时，首先要用10%家兔灭活血清洗涤精子，尽可能把精浆成分除去，以免降低精子制动抗体的效价。