精子细胞毒试验
抗精子抗体与精子结合后，在补体参与下，可导致精子制动和死亡，利用台盼蓝或伊红y等染料使死精子染色，间接验证血清或分泌液中是否有制动精子的抗体存在。
（一）台盼蓝染色法
【准备】
（1）待检血清的分离和灭活补体。
（2）ab血型人血清（补体）制备。
（3）2%台盼蓝液配制（用蒸馏水）。
（4）台盼蓝-生理盐水溶液配制：取适量生理盐水，加等体积2%台盼蓝水溶液，混匀即可。
（5）配制0.01mol/l，ph7、4pbs溶液。
【方法】
（1）取正常新鲜精液用ph7、4pbs作1∶10稀释，以500r/min30min离心洗涤一次，弃去上清，沉渣用pbs调整精子浓度为100×106/ml的精子悬液。
（2）在小试管内加入1滴待检血清，1滴精子悬液和2滴补体血清。置37℃孵育，并于30min、60min分别追加2滴补体血清，直至90min后加入1滴台盼蓝生理盐水溶液，继续孵育60min，取出小试管，以500r/min，30min离心，弃去上清，将沉渣涂片，待干燥后镜下观察。以阴性血清作对照组，以同样条件和方法处理。
（3）计数：对照组：记录数至100个无染色精子（活精子）时所需的总精子数（含100个无染色精子加一定数量染色的死精子）。实验组：记录对照组相应的总精子数，把其中所含的无染色精子（活精子）数作x。将100-x所得的数目，即为被检血致死的精子数，这个数目称为精子毒性指数（sti）。
【判断】
（1）sti>25时，p≤0.01、判为阳性。
（2）sti在15～20之间，判为可疑。
（3）sti<15时，判为阴性。
本法所得阳性率与精子制动试验的阳性率较为一致。
（二）伊红y染色法
【准备】
（1）用蒸馏水配制4%伊红y染液。
（2）配制0.01mol/l，ph7、4pbs溶液。
【方法】
（1）取正常新鲜精液（精子浓度宜大于：60×106/ml），用ph7、4的pbs洗涤3次，调整精子浓度为10×107/ml。
（2）取精子悬液16μl，移置载玻板的漆孔内，分别设2个测定和对照孔，另取待检血清20μl，补体血清4μl加入测定孔内，对照孔只加待测血清不加补体，充分混匀。
（3）把玻板移入湿盒内，在37℃孵育30min，每孔加4%伊红y4μl，加上盖玻片使其作用2min，进行镜检。
【判断】
由于活精子不着色，死精子着染为红色，计算200个精子中，死精子所占的百分数，减去对照组死精子的百分数，即为抗体杀灭精子的百分率。以杀灭精子≥10%以上者为阳性。
