分辨乙肝病毒标志物

关键词肝炎病毒，乙型。聚合酶链反应。酶联免疫吸附测定。免疫荧光分析，时间分辨applicationoftime-resolvedfluoroimmunoassayinthedetectionofhbvmarkers.luokai-zhong,yangxu,suxian-shi,xuyun,liliang-you.keywordshepatitisbvirus。polymerasechainreaction。enzyme-linkedimmunosorbentassay。fluoroimmunoassay,time-resolvedfirstauthor抯addressliverdiseasesresearchcenter,secondxiangyahospital,centralsouthuniversity,changsha410011,china

临床工作中发现少部分经酶联免疫吸附法（elisa）检测仅乙型肝炎表面抗原（hbsag）和抗-hbcigg阳性的患者，病毒含量却很高。为此，采用时间分辨免疫荧光分析法（trf）对34例此类患者进行乙型肝炎标志物（hbvm）的检查，现将结果报道如下。一、资料与方法1.病例选择为2002年2月至9月住院或门诊患者，共34例，男21例，女13例，年龄5～58岁，平均（29.2±。18.7）岁。采静脉血分离血清，用elisa进行hbv标志物（hbvm）检测及hbvdna定量检查。留取血清置-30℃保存。（1）hbsag、抗-hbcigg阳性，乙型肝炎e抗原（hbeag）、抗-hbs、抗-hbe、抗-hbcigm阴性。（2）hbvdna含量＞104拷贝/ml。（3）近3个月未使用抗病毒药物。每人进行2次抗原抗体检查，结果一致。2次hbvdna检查，结果相差1个数量级以下。2.常规hbvm检测用elisa法，试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品，按产品说明书操作。3.hbvdna含量测定采用实时荧光定量pcr法，试剂盒购自中山医科大学达安基因诊断中心。仪器为美国perkinelmer公司geneamp甈e5700型pcr仪。严格按说明书操作，检测灵敏度为103拷贝/ml。4.trf法检查hbvm试剂为上海新波生物技术有限公司产品，采用anytest2000时间分辨检测仪。严格按照产品说明书操作。5.统计分析取hbvdna含量的对数值进行成组设计的两样本均数比较，行t检验。二、结果1.hbvm用trf法检查发现，34例患者中hbsag、hbeag、抗-hbc均阳性者15例，hbsag、抗-hbe、抗-hbc均阳性者14例，仅hbsag、抗-hbc阳性者5例。即用elisa检查时hbeag假阴性15例，抗-hbe假阴性14例（表1）。